紫外凝胶成像仪是一种实验室设备,主要用于生物医学和医药领域,对蛋白质和核酸凝胶进行成像和分析。它提供的功能包括分子量定量、密度定量、密度扫描、PCR定量等。具体介绍如下:
1.分子量定量:通过对DNAMarker条带的已知分子量进行注释,自动生成拟合曲线,进而准确衡量未知条带的分子量。
2.密度定量:在测定DNA和RNA浓度时,先对标准条带进行密度标定,然后比较未知条带的密度,从而得到其含量。
3.密度扫描:用于计算蛋白表达产物在菌体蛋白中的百分比含量,较传统方法更简便。
4.PCR定量:计算PCR实验扩增出来的不同条带相对于总体条带的百分数。
紫外凝胶成像仪的正确使用过程包括准备阶段、操作步骤和图像获取与分析等。具体介绍如下: 1.准备阶段
工作环境要求:仪器应放置在室温15-30℃,相对湿度不大于80%的环境中工作。工作台应平坦、牢固,无振动或其他影响仪器正常工作的现象。
样品准备:将电泳后的琼脂糖凝胶置于拍摄面板上。确保凝胶没有气泡,位置正确。
2.操作步骤
开机:先打开凝胶成像系统,再开电脑并进入软件。
放置凝胶并调整参数:把电泳后的凝胶样品放在紫外凝胶成像仪上,设置成像参数如波长、照度和曝光时间等。
拍摄图像:打开UV1键,进行自动预览及捕获图像,点击拍照键完成拍摄。
3.图像获取与分析
启动成像程序:记录图像后,可利用系统自带的图像捕捉和分析软件对拍摄的图像进行处理和分析。
图像处理:通过软件对图像进行剪辑、标记,自动寻找凝胶条带,并与标准条带比较计算分子量或密度。
数据输出:详细的分析结果可以输出成Excel格式,便于进一步编辑和分析。
4.维护保养
清洁:定期清理仪器表面和拍照面板,保持紫外灯箱及投影白光板的清洁。
检查:每次使用后检查数据线连接是否正常,软件功能是否完好。
注意事项:避免用力推动关闭暗箱门,以保护机械结构。
5.使用注意事项
防止污染:不要用被污染的手套接触凝胶成像系统的部件,避免EB污染。
光源使用:在使用紫外光源期间,切勿打开凝胶成像仪的前面板,以防紫外线伤害。
稳压电源:使用稳压电源,确保仪器稳定运行。